鸡新城疫病毒抗体检测试剂盒(酶联*法) 英文名:(Newcastle disease virus ,NDV) (ELISA) 【包装规格】 96T/盒 【预期用途】鸡新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus ,NDV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。本病主要特征是呼吸困难、严重下痢、粘膜和浆膜出血,病程稍长的伴有神经症状。鸡感染后,体内会产生特异性抗体。检测抗新城疫病毒抗体可作为该病***状况及该病辅助检测指标。 【原 理】 本试剂盒采用ELISA方法检测鸡血清中的特异性抗新城疫病毒抗体。本试剂灵敏度高,特异性强,重复性好,操作方便**,可分多次使用。 【储存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期为12个月。 包被板开封后请于2~8℃避光保存,使用期限为1个月。 【试剂盒组成】 1. 鸡新城疫病毒抗原预包被微孔板条 96T 2. 酶标记物 (红盖) 6ml 3. 样品稀释液 (黄盖) 50ml×1 4. 20X浓缩洗涤液 (透明盖) 40ml×1 5. 底物液A (白盖) 6ml×1 6. 底物液B (黑盖) 6ml×1 7. 终止液 (黄盖) 6ml×1 8. 阳性对照 (红盖,已灭活) 1 ml×1 9. 阴性对照 (绿盖,已灭活) 1 ml×1 10. 盖板膜 1张 11. 自封袋 1个 12. 说明书 1份 【样品制备】 取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品短期可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。 【样品稀释】 用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如5μl血清加入495μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。 【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。 【试验操作方法】 1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。 2.取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。 3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照血清100μl;样品孔每孔加入稀释后的血清样本100μl;空白对照孔不加。 4.混匀,置37℃反应30分钟。 5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。 6.每孔加酶标记物50μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。 7.洗涤,同步骤5。 8.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。 9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A450)。 【结果判定】 1.阴性对照:正常情况下,阴性对照孔A值≤0.10; 2.阳性对照:正常情况下,阳性对照孔A值≥0.3; 3.结果判定:样品A450值大于0.18,判为阳性;样品A450值小于0.18,判为阴性。